Suiweringstoerusting vir Oligo-suiwering

1. Gel Elektroforese Chromatografie Suiwering
Gebruik denaturerende poliakrielamied gel elektroforese chromatografie vir suiwering.Die denatureringsmiddel is oor die algemeen 4M formamied of 7M ureum, die konsentrasie van akrielamied is tussen 5-15%, en die proporsie van metakrilamied is hoofsaaklik tussen 2-10%.
Na elektroforese moet die posisie van die nukleïensuurband onder die bestraling van ultravioletlig bepaal word, die gel wat die teikennukleïensuur bevat word afgesny, die nukleïensuur word stukkend geslaan en geloog, en dan word die logingsoplossing gekonsentreer, ontsout, gekwantifiseer en gevriesdroog.

2. DMT-On, HPLC Suiwering
Kies die DMT-Aan modus tydens die sintese, die ruproduk is gesentrifugeer en by kamertemperatuur gekonsentreer om oortollige ammoniak na die aminolise te verwyder.
Skeiding is uitgevoer met behulp van 'n C18 kolom met asetonitril en 10% triëtielamien-asynsuur (TEAA) as die eluent.Nadat die eluering voltooi is, word dit gekonsentreer, en dan word die DMT-groep met trifluorasynsuur verwyder.Na neutralisering word sommige soute en klein molekules deur 'n afgesnyde buis verwyder, en uiteindelik ontsout.

Hierdie metode kan 'n produk met hoër suiwerheid verkry, maar dit is nodig om aandag te skenk aan die voorkoms van depurinering.

3. DMT-Off, HPLC Suiwering
Kies die DMT-Off tydens die sintese, en die ruproduk is gesentrifugeer en by kamertemperatuur gekonsentreer om oortollige ammoniak na ammonolise te verwyder.
Skeiding is uitgevoer met behulp van 'n C18 kolom met asetonitril en 10% triëtielamien-asynsuur in water as eluent.Nadat die skeiding voltooi en gekwantifiseer is, word die aliquots gevriesdroog.

Hierdie metode vereis noukeurige aanpassing van skeidingstoestande, en kan ook relatief suiwer teikenmolekules verkry.