Die basiese beginsel van DNA-sintese

Die chemiese DNA-sintese is gebaseer op die vastefase-sintesestrategie en fosforamidietchemie.Anders as die biologiese DNS-sintese, is die materiaal in chemiese DNS-sintese DMT (4, 4-dimetoksitritiel) en fosforamidiet-gemodifiseerde deoksiriboksied, soos getoon in Figuur 1. Die DNS-sintese word op die soliede ondersteuning uitgevoer (ons kan verskeie vanOligosintesekolom), dws CPG (beheerde porieglas) en PS (polistireen), en die hele sintese word uitgevoer op 'nDNA/RNA-sintetiseerder, wat ons hooftoerusting is, het verskillende modelle soos: HY Enkelkanaal Sintetiseerder, HY-12, HY-192 en ens., die sintese rigting is van 3' tot 5', en 'n nukleotied word ingevoer na die vaste ondersteuning via een sintese siklus.'n Tipiese sintese-siklus bevat vier stappe, Ontbeskerming, Koppeling, Bedekking en Oksidasie (Figuur 2).Die Deprotection is ingestel om die DMT-groep op die vaste ondersteuning of die 5'-hidroksielgroep op die vorige nukleosied te verwyder, die 3% trichloorasynsuur in dichloormetaan word as die deprotection-reagens gebruik.Toe is die fosforamidiet-gemodifiseerde deoksiriboksied toegelaat om die hidroksielgroep bloot te stel met die hulp van aktiveerder, dws 5-etieltiotetrasool of 4,5-dicyanoimidasool, wat die fosfitetriester (III) vorm, en het die Koppelingstap gerealiseer.'n Afdekkingstap word uitgevoer om die ongereageerde hidroksielgroep tydens koppelingstap te blokkeer, om die vorming van ongewenste defekreekse te minimaliseer.Laastens word die onstabiele fosfitetriester (III) geoksideer tot chemiese stabiele fosfortriëster (V) met jodium as oksidant in die teenwoordigheid van piridien.

Die gesintetiseerde DNS kan deur aminolise van die vaste ondersteuning afgesplits word, die 2-sianoetielbeskermde groep op die fosfortriëster en die amied op die nukleobase word terselfdertyd gesplyt, die Sinteseplate en Sintesekolomme in rakke word direk in die reaksiekamer geplaas van dieOntbeskermingstoerusting.Ru-DNS kan op aanvraag deur HPLC, elektroforese en OPC voorberei word, ons kan jou ook dieSuiweringstoerustingvir naverwerking.