Beginsel van Oligo Sintetiseerder
In die velde van molekulêre biologie en genetika-navorsing speel die vermoë om DNS te sintetiseer 'n deurslaggewende rol.DNA-sintese behels die kunsmatige produksie van DNA-molekules deur nukleotiede in 'n spesifieke volgorde te rangskik.Om dit te bereik, maak wetenskaplikes staat op 'n kragtige instrument bekend as 'n oligonukleotied-sintetiseerder, ook bekend as 'n DNA-sintetiseerder.
'n Oligonukleotiedsintetiseerder is 'n gesofistikeerde instrument wat outomaties kort DNA-molekules genaamd oligonukleotiede sintetiseer.Hierdie kort DNA-stringe is tipies 10 tot 100 nukleotiede lank en is noodsaaklike boustene in 'n wye verskeidenheid toepassings, insluitend polimerase kettingreaksie (PCR), geensintese, genetiese ingenieurswese en DNA-volgordebepaling.
Oligonukleotiedsintetiseerders werk op die beginsel van 'n tegniek bekend asvastefase sintese.Hierdie metode is vir die eerste keer in die 1970's deur Nobelpryswenner Dr. Marvin Caruthers begin en is oor die jare verfyn om die sintese van DNS-volgordes te verbeter.Oligonukleotiedsintese word uitgevoer deur 'n stapsgewyse toevoeging van nukleotiedresidu tot die 5'-terminus van die groeiende ketting totdat die verlangde volgorde saamgestel is.Daar word na elke byvoeging verwys as 'n sintesesiklus en bestaan uit vier chemiese reaksies:
Stap 1: Deblokkering (detritilering)---------Stap 2: Koppeling---------Stap 3: Afdekking ------------Stap 4: Oksidasie
Hierdie proses word vir elke nukleotied herhaal totdat die verlangde volgorde verkry is.Vir langer oligonukleotiede moet hierdie siklus dalk verskeie kere herhaal word om die hele volgorde te sintetiseer. Die vermoë om elke stap van die sintese-siklus presies te beheer is van kritieke belang vir 'n oligonukleotiedsintetiseerder.Die reagense wat gebruik word, soos nukleotiede en aktiveerders, moet van hoë gehalte wees om akkurate en doeltreffende sintese te verseker.Boonop benodig sintetiseerders hoë-presisie temperatuurbeheer en ander omgewingstoestande om gewenste koppelingsreaksies te bevorder en ongewenste reaksies te voorkom.
Sodra 'n oligonukleotied volledig gesintetiseer is, word dit tipies van die vaste ondersteuning afgesplit en gesuiwer om enige oorblywende beskermende groepe of onsuiwerhede te verwyder.Die gesuiwerde oligonukleotiede is dan gereed vir stroomaf toepassings.
Vooruitgang in tegnologie het die ontwikkeling van hoë-deurset oligonukleotiedsintetiseerders moontlik gemaak wat in staat is om gelyktydig honderde of selfs duisende oligonukleotiede te sintetiseer.Hierdie instrumente gebruik mikroskikking-gebaseerde sintesetegnologie, wat navorsers in staat stel om vinnig groot oligonukleotiedbiblioteke vir 'n verskeidenheid navorsingsdoeleindes te genereer.
Samevattend, die beginsels agter oligonukleotiedsintetiseerders wentel om soliede-fase sintese tegnieke, wat die stapsgewyse byvoeging van nukleotiede op 'n soliede ondersteuning behels.Presiese beheer van die sintesesiklus en hoë kwaliteit reagense is noodsaaklik vir akkurate en doeltreffende sintese.Oligo-sintetiseerders speel 'n belangrike rol in DNS-navorsing, wat wetenskaplikes in staat stel om pasgemaakte oligonukleotiede vir 'n verskeidenheid toepassings te genereer, wat bydra tot vooruitgang in biotegnologie en genetiese navorsing.
Postyd: Aug-01-2023